当前化学合成多肽的方法主要有两种，即 Fmoc 和 t Boc ；由于 Fmoc 比 tBoc 存在更多优势，所以现在较流行的是 Fmoc 法。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，合成方向是从 C 端（羧基端）向 N 端（氨基端）进行；过去多肽合成大多是在液相中进行，现在大多采用固相合成，从而大大的降低了每步产品提纯的难度；为了防止副反应的发生，合成柱和添加的氨基酸的侧链都是预先被保护的，只有羧基端是游离的，并且在反应之前必须先用化学试剂活化它。
具体合成步骤如下：
1 、去保护： Fmoc 保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（ piperidine ）去除氨基的保护基团。（如图 1 ）
2 、激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活溶解，激活的单体与游离的氨基在交联剂的作用下交联，形成肽键。（如图 2 ）
3 、循环：这两步反应反复循环直到整条肽链合成完毕。
4 、洗脱和脱保护：根据肽链所含的残基不同，用不同的脱树脂溶剂从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂（ TFA ）洗脱和脱保护。